Bakteriologisk Teknik for Medicinere

118 Spredning i højt Lag Næringsgelée, Kulsyrestrøm eller Luftpumpe; i de senere År har man navnlig søgt at gjøre Spredningsmethoderne frugtbringende også for Analysen, af de anaerobholdige Bakterieblandinger. Hvorledes dette opnås, skulle vi først omtale. Fig. 64. Sprednings- kultur af Anaero- bionteri højt Lag efter Liborius. A. Spredning’ i faste Næriugssubstrater. 1. Spredning i meget høje Lag smeltelig Næringsgelée (Liborius). Når vi ville foretage en sådan Spredning f. Ex. i Agar, er Fremgangsmåden følgende: Tre (eller endnu bedre fire) Reagensglas, indeholdende et 10—15 Ctm. højt Lag Nærings- agar, smeltes i Vandbad (s. Fig. 39, S. 81) og forblive i dette 5—10 Minutter, efter at Smeltningen er fuldendt, medens Vandet stadigt holdes i Kog; derpå lader man Agaren afkjøle i Vandbadet, og når Thermometret er sunket til 40°—42°, foretages Såningen; Ud- sæden fordeles såvidt muligt ligeligt ved Hjælp af en steril Glasstang, med hvilken man forsigtigt foretager roterende samt op- og nedadgående Be- vægelser i Gelatinen. Derpå sår man fra det til- gåede Glas over i Glas Nr. 2, Nr. 3 og eventuelt Nr. 4, så at man får tre eller fire Fortyndinger (smig. S. 76), fordeler i dem alle Udsæden så ligeligt som muligt med Glasstangen, der passende kan benyttes som Podeapparat, fra Glas til G-las; derefter påskynder man Agarens Stivning ved at stille Glassene i koldt Vand. Er Fordelingen lykkedes godt, og har dé opstemmede Kims Antal været passende, så kan man få meget smukke Billeder: Aerobe Kolonier, aftagende i Mængde og Størrelse fra Overfladen og nedefter, medens om- vendt de anaérobe Former kun spire ved Bunden og aldeles mangle i de øverste Lag; i hvert Fald giver Fordelingen af Kolonierne altid et godt Holdepunkt for Bedømmelsen af deres Ilttrang; naturligvis vanskeliggjøres Isoleringen af de obligat anaerobe Arter under disse Forhold meget, når der i Blandingen er fakultativt anaerobe