Studier Over Proteolytiske Enzymer I Spirende Byg (malt)

32 «lier Skumdannelse. Der anvendtes i Reglen til Dekompositionen 10 Ccm. conc. Svovlsyre foruden en Spatel Kobberilte. Erfaringen lærte mig imidlertid snart, at jeg, for at faa en fuldstændig Sønder- deling maatte udstrække Kogningen med Svovlsyre + Kobberilte temmelig længe, 4—5—6 Timer, endog ret længe efter at Væsken var bleven klar, for at alt Kvælstof ved den derpaa følgende Ilt- ning med Kaliumpermanganat kunde blive omdannet til Ammoniak. Destillation og Titrering (af 1/7 normal Svovlsyre paa Natrium- hyposulfit af en saadan Styrke, at 1 Ccm. svarede til 1 Mgm. Kvælstof) udførtes ganske paa den af Kjeldahl1 angivne Maade. Grundforsøgene. — For at undersøge en enkelt Faktors Indflydelse paa Proteolysen maa jo alle andre Faktorer end netop denne være konstante. Jeg har derfor, efter en Del orienterende Forsøg, valgt en Grundtype for min Forsøgsanstilling, som jeg tid- ligere lejlighedsvis har berørt, men nu skal definere nærmere. Ved et saadant Valg gjælder det om at finde de saa vidt mulig gun- stigste Betingelser for Enzymvirkningen, paa samme Tid som man let og praktisk skaffer sig et Maal for denne og kan udføre saa mange Forsøg som muligt i den Tid, indenfor hvilken en variabel Størrelse, som f. Ex. selve Fermentevnen i Maltudtrækket, holder sig nogenlunde konstant. Med Undtagelse af den ene Faktor, som jeg med Hensigt har ladet variere eller har ombyttet med en helt anden, har Forsøgsanstillingen da været følgende: Der anvendtes lige Rumfang (10 Ccm.) af et Maltudtræk med c. 18—20 Mgm. Kvælstof, friskt tilberedt af 3 Dele knust Grøn- malt + 4 Dele Vand, og af en Hvedeproteïnoplesning paa 2% (med c. 30 Mgm. Kvælstof) i 0,4 procentholdig Mælkesyre. Herved blev Koncentrationen af Hvedeproteïn i Blandingen 1 %, som tilligemed selve Maltudtrækkets Æggehvidestoffer i de 20 Ccm. Forsøgsvæske gav et Kvælstofindhold paa ialt c. 50 Mgm. Syregraden blev 0,2 % Mælkesyre foruden de sure Fosfater, der findes i Maltudtrækket, Forsøgsvæsken anbragtes i 100 eller 50 Ccm.s Maalekolber, der stilledes i Vandbad (smaa Mæskekar) ved henholdsvis 47°—48° eller 50°—51°, eftersom der senere anvendtes Garvesyre eller Stannochlorid til Fældningen. Anvendtes begge Fældningsmidler, var Temperaturen i Reglen 50°. Forsøgstiden var 2, i flere For- søgsrækker dog 3, Timer. Forsøgene afbrødes ved Tilsætning af Fældningsmidlerne; naar det var Garvesyre dog først efter Afkøling under Vandhanen. Der anvendtes 10 Ccm. 5 procentholdig Garvesyre- opløsning (+ en Smule Natriumacetat) eller 20 Ccm. Stannochlorid- 1 Se Kjeldahl: Meddelelser fra Carlsb. Labor. II, 323 (1888).