Studier Over Proteolytiske Enzymer I Spirende Byg (malt)

79 H. Række (Forss. 1669—1710). Det her anvendte Maltud- træk blev neutraliseret (men paa anden Maade end det fore- gaaende), før det toges i Brug. Paa Grund af en særegen Frem- stillingsmaade (Digestion af 700 Gr. Malt først med 700 Gr. Vand og efter Filtration Dagen efter igjen med 230 Gr. Vand; de to Filtrater blandedes) var det meget rigt paa Kvælstof, idet det indeholdt før Neutraliseringen 23,84 Mgm. pr. 10 Ccm., hvoraf 12,08' unddrog sig Fældning med Garvesyre. Til Neutralisationen an- vendtes som Indikator Fenolftalein, overfor hvilken primære Fos- fater reagere surt, sekundære alkalisk. Efter at det var fundet, at 10 Ccm. Maltudtræk krævede 2,85 Ccm. 1/io n. Natriumhydroxyd, før Fenolftaleïnet gav et netop kjendeligt rødt Skær, neutrali- seredes der med 2/i n. Natriumhydroxyd for at undgaa for stærk Fortynding, idet der heraf til 300 Ccm. Maltudtræk sattes 4,25 Ccm. En udtagen Prøve af Maltudtrækket gav nu netop det rødlige Skær med Fenolftalein, men sattes yderligere en Draabe 1/io n. Natrium- hydroxyd til, fik Væsken en stærk rød Farve. Ved Neutralisa- tionen udfældedes et voluminøst Bundfald, der filtreredes fra og senere digereredes med svagt mælkesurt Vand (c. 2 %o Mælkesyre),, for at man i særlige Forsøg kunde undersøge, om dette Bundfald skulde være i Besiddelse af proteolytisk Fermentevne. Det neutra- liserede Maltudtræk indeholdt i 10 Ccm. 23,12 Mgm. Total-Kvæl- stof, hvoraf 11,76 Mgm. unddrog sig Fældning med Garvesyre. Der viste sig nu Vanskeligheder ved Anvendelsen af Hvede- proteinet, da det kun i ringe Grad var opløseligt i de svage Kon- centrationer af Alkali, som det var ønskeligt at undersøge. Det tilstræbtes nemlig at anvende saadanne Koncentrationer, dei vare ækvivalente med de tilsvarende af uorganiske Syrer, Saltsyre og Svovlsyre, som vare undersøgte i tidligere Forsøg (se p. 77). Jeg valgte derfor et andet Æggehvidestof, Legumin, der viste sig at være noget lettere opløseligt, og om hvilket jeg fra en særlig For- søgsrække (se Afsn. IV,3) vidste, at det meget kraftigt lod sig paa- virke af Maltudtrækket i sur Opløsning. Der tilberedtes forskjellige 2 procentholdige Leguminopløsninger i Natriumhydroxydopløsninger af forskjellig Styrke, nemlig 1/800, 1/400, 1/200, 1/100, 1/75, 1/50, 1/20 og 1/10 normal. For at fremme Opløsningen opvarmedes der 1 Time paa Vandbad. I de 6 første Koncentrationer opløste Leguminet sig ikke fuldstændigt, saa Opløsningernes Indhold af Kvælstof blev noget mindre end de følgende, men dog stigende med Koncentra- tionerne af Natriumhydroxyd. Det uopløste filtreredes fra. I 1/20 og 1/10 normal Natriumhydroxyd vare Opløsningerne fuldstændige, og disse tillige med Prøven i 1/60 normal havde en gullig Farve. Ved